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            NK細胞活化擴增方法,Corning版

            更新時間:2018-02-08 點擊次數:2333

            NK 細胞活化

            1.  熱滅活自體血漿,56°C,30min。離心, 800 xg , 20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血漿,培養備用。
            2.  至少5倍體積的PBS(不含鈣鎂)清洗PBMCs。室溫離心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培養基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
            3. 預包被T-75培養瓶使用前,用PBS(不含鈣鎂)清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養瓶,37°C,5% CO2培養。

            注意:第六天之前,如果培養基變黃,細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL,需要添加新鮮的NK活化培養基配比10%自體血漿,保持細胞密度在在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。

            NK細胞擴增

            1.  培養第六天,培養液離心,適量NK擴增培養基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)重懸細胞,再轉移到T-225培養瓶或透氣細胞培養袋。
            2. 每隔兩三天,根據細胞擴增狀態,培養體系中添加新鮮的NK擴增培養基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)保持細胞密度在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。
            3.  細胞總量到達2 x 109 收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

            注意:整個實驗過程中,細胞懸液吹打和培養容器拍打都要輕柔,以避免細胞損傷,保持細胞活性。

             

            Corning® NK細胞活化擴增培養套裝

            英文名:Corning® NK Expansion Kit

            中文名:Corning® NK細胞活化/擴增培養套裝

             

            應用:NK細胞活化擴增

            品牌產地:美國Corning

            保存:2°C - 8°C

             

            NK細胞是當今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養操作難度大,對培養條件、培養技術要求很高,難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養基套裝由多個組分組成,為 NK細胞培養提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數量產量高,活性高,具有很高的殺傷效應。

            產品組成

            NK細胞活化培養基

            NK細胞活化添加劑

            NK細胞擴增培養基

            抗體預包被T75細胞培養瓶

            細胞培養袋

             

            產品特色

            擴增能力強,在14天內可達到100倍擴增

            效應細胞比例高,可達80%

            操作方便

             

            產品訂購信息

             

            品牌

            貨號

            產品描述

            包裝

            Corning

            88-570-kit

            NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells

            NK細胞活化/擴增培養基套裝

            1Kit

            套裝包含

            活化用

            Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養瓶

            1瓶

            NK primary medium NK細胞活化培養基

            1×50 mL

            NK primary supplement NK細胞活化添加劑

            1×1.8 mL

            擴增用

            Expansion medium NK細胞擴增培養基

            1×1000 mL

            配件

            細胞培養袋

            1 x 640 cm2

             

             

             

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